国产精品国产精品一区精品国产自在现偷99精品国产在热2019国产拍偷精品网国产精品视频全国免费观看,国产精品v欧美精品v日韩精品青青精品视频国产久久国产精品久久精品国产亚洲精品国产精品国产欧美精品一区二区三区,国产精品第一页国产亚洲精品国产福利国产精品自拍国产精品视频在线观看亚洲国产精品一区二区久久国产精品国产三级国产专不,国产精品视频大陆精大陆国产国语精品2019精品国产品对白在线285年香蕉精品国产高清自在自线隔壁老王国产在线精品在线观看精品国产福利片,国产三级精品三级在专区精品国产自在现偷国产精品一区二区三区国产日韩精品欧美一区喷水亚洲精品国产精品国自产国产在线精品一区二区不卡

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購(gòu)物車 1 種商品 - 共0元
當(dāng)前位置: 首頁(yè) > 行業(yè)資訊 > 噬菌體效價(jià)實(shí)驗(yàn)

噬菌體效價(jià)實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)材料:

菌株λ噬菌體溶原株 Escherichia coli K12 WK 6 λ

λ噬菌體敏感株:Escherichia coli  C600 CR34

培養(yǎng)基:肉湯培養(yǎng)基;軟瓊脂:肉湯培養(yǎng)基中加入0.5%瓊脂10ml/

培養(yǎng)條件: NA培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基,37

 

二、實(shí)驗(yàn)步驟:

1.7.5ml 新鮮E.coli λ 菌液離心

2.菌沉淀用1ml無(wú)菌水懸浮

3. 菌懸液加在無(wú)菌平皿中央,開皿蓋,在安全柜的紫外燈下照射15秒(0.15mJ/cm2

4.加入NA培養(yǎng)液5ml

5.37℃暗培養(yǎng)3小時(shí)

6.吸取以上菌液-培養(yǎng)液混合物,加1 - 0.5ml氯仿震蕩后離心12000rpm2分鐘

7.上清十倍稀釋至10-7

8.選擇10-510-6、10-7上清稀釋液100ul 100ul受體菌(CCTCC AB 2013330)混合

9.37℃溫浴20分鐘

10.混合菌液加入到NA軟瓊脂(不燙手)中震蕩混勻倒NA平板

 

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

1.稀釋度為10-4的平板:布滿噬斑不可數(shù)

2.稀釋度為10-5的平板:噬斑346個(gè)

3.稀釋度為10-6的平板:噬斑37個(gè)

4.稀釋度為10-7的平板:噬斑4個(gè)

 

 四、實(shí)驗(yàn)建議:

1.噬菌體液體放置在室溫下兩周會(huì)導(dǎo)致數(shù)量下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。

2.宿主菌必須是噬菌體敏感菌株CCTCC AB 2013330,教學(xué)用普通大腸菌和噬菌體溶原菌株不能產(chǎn)生噬菌斑。

3.瓊脂的濃度(1.5%-2.0%),過高或過低的瓊脂含量均不能達(dá)到好的效果。

4.噬菌體與細(xì)胞的比例,測(cè)定噬菌體效價(jià)應(yīng)采用低感染復(fù)數(shù)。

5.指示菌密度是在平板上獲得清晰噬菌斑效果的重要因素之一,其細(xì)胞密度不宜過高。一般控制在1107個(gè)細(xì)胞/ml為宜。

1. 上一排為平板背面照片,下一排為平板正面照片。

洛川县| 盐源县| 玛曲县| 梓潼县| 山东省| 昭通市| 武功县| 聂荣县| 兴海县| 逊克县| 玉山县| 贵德县| 绍兴县| 兴宁市| 丰县| 峨边| 呼伦贝尔市| 米泉市| 田东县| 库尔勒市| 岱山县| 小金县| 留坝县| 中西区| 海淀区| 花莲县| 永昌县| 红安县| 鸡西市| 杨浦区| 宝应县| 西贡区| 马山县| 高阳县| 永新县| 奎屯市| 合水县| 县级市| 恩施市| 河曲县| 辽阳县|